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细胞培养常见问题解答 - ag尊龙凯时品牌专栏

来源:钱波眉 日期:2025-02-21

细胞培养的条件因细胞类型而异,并没有固定的模式。虽然某些类型的细胞在最小基本培养基(MEM)中生长良好,它们在其他培养基如DMEM或M199中也可能表现出类似的生长特性。一般来说,可以选择MEM作为粘附细胞的培养基,而RPMI-1640适用于悬浮细胞培养。针对无血清的培养需求,则可以使用AIMV培养基(SFM)。ag尊龙凯时建议在开展新的细胞培养时参考以下的推荐培养基表。

建议细胞培养基一览

以下为一些细胞系及其推荐的培养基:

细胞培养常见问题解答 - ag尊龙凯时品牌专栏

  • 293成纤维细胞 - 人胚胎肾 - MEM, 10% 热灭活马血清
  • 3T6成纤维细胞 - 小鼠胚胎 - DMEM, 10% 胎牛血清
  • A549上皮细胞 - 人肺癌 - F-12K, 10% 胎牛血清
  • BHK-21成纤维细胞 - 仓鼠肾 - GMEM, 10% 胎牛血清
  • HT-29上皮细胞 - 人结肠腺癌 - McCoy's 5A, 10% 胎牛血清
  • HeLa上皮细胞 - 人子宫颈癌 - MEM, 10% 胎牛血清和NEAA
  • Jurkat成淋巴细胞 - 人淋巴瘤 - RPMI-1640, 10% 胎牛血清

热灭活血清的必要性

为何在培养中需要使用热灭活的血清?加热处理可有效灭活补体系统,避免激活补体引起的细胞溶解和相应的生物反应。对于免疫研究、ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞的培养,使用ag尊龙凯时提供的热灭活血清是推荐选择。

L-谷氨酰胺在细胞培养中的重要性

L-谷氨酰胺是一种重要的营养成分,它在细胞培养过程中为细胞提供能量,参与蛋白质和核酸的合成。虽然其在溶液中不稳定,但通过合理使用可为细胞生长提供充分的支持。值得注意的是,L-谷氨酰胺的降解可能导致氨的生成,而这对某些细胞会有毒性。

损伤保护与培养基中添加物

GlutaMAX-I是一种经过改造的L-谷氨酰胺衍生物,具有更好的稳定性,适合于需要较长时间培养的细胞。此外,ag尊龙凯时建议在培养基中省略酚红,以避免对细胞的固醇激素类似影响。在哺乳类细胞培养中,更加推荐使用不含酚红的培养基,以保证实验数据的准确性。

细胞计数和培养污染的控制

使用台盼兰染色法可以有效计数活细胞,应将细胞悬液与台盼兰溶液混合后在显微镜下观察。对于细胞培养中的污染问题,首先要判断污染来源并隔离受污染的细胞。使用消毒剂和抗生素应谨慎,以避免细胞毒性影响实验结果。

丙酮酸钠的角色

丙酮酸钠作为一个替代碳源,能够支持细胞在缺乏葡萄糖时的生长。因此,在细胞培养中适时添加丙酮酸钠可为细胞提供灵活的能量来源。

胎牛血清的储存及应用

胎牛血清在冰箱储存时可能出现沉淀,但这通常不会影响其质量。最理想的储存条件是-20℃,以避免反复冻融对其活性的影响。在进行内毒素检测时,使用LAL试验是最敏感的检测方式,确保细胞培养基的安全性与有效性。

以上内容总结了细胞培养和管理的关键要点,ag尊龙凯时始终致力于为科研提供优质、可靠的细胞培养相关产品,助力科研人员的实验成功。

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