THP-1细胞简介

THP-1细胞系来自一名1岁男孩的外周血，诊断为急性单核细胞性白血病。该细胞具有吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力，且细胞膜和胞浆内不含免疫球蛋白，表达C3R和FcR。此外，THP-1细胞能够被佛波酯TPA诱导向单核细胞系分化，可用作转染宿主。

细胞信息

细胞名称：THP-1人单核细胞白血病

生长特性：该细胞以悬浮形式生长，低密度时易聚团，高密度时则会分散。

倍增时间：60-70小时（PubMed=6970727）；26小时（PubMed=25984343）；约35-50小时（DSMZ=ACC-16）。

换液频次：2~3次/周

传代比例：1:2至1:4，具体视实际细胞量而定，传代时细胞密度应控制在8X10⁶/ml，不可超过1X10⁶/ml。

培养基推荐配方

使用RPMI-1640培养基（中乔新舟货号：ZQ-200），添加10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500），1%双抗（中乔新舟货号：CSP006），以及终浓度为0.05mM的β-Mer（中乔新舟货号：CSP005，例：500ml需添加500μl）。β-巯基乙醇作为常用的培养补充剂，具有抗氧化作用，能有效降低氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度较高而需要维持时，可适当增加巯基乙醇的添加比例（不超过标准量的15倍）。

THP-1细胞复苏

THP-1细胞复苏后通常需3-5天才能恢复正常状态。细胞对密度的依赖性较强，因此如果复苏时清洗掉冻存液，建议在复苏后的48小时内避免任何操作。细胞在低密度状况下容易以团状生长，这是细胞活跃增殖的正常表现。

THP-1细胞传代

A. THP-1为悬浮细胞，密度达到8×10⁵/mL时应进行传代，活细胞浓度不超过1×10⁶/mL。

B. 一般传代比例为1:2至1:4，无需离心，可直接分瓶并补充培养液。T25培养瓶可补充新鲜完全培养基至7ml。

C. 对于悬浮细胞，最有效的方式是进行细胞计数，以确保密度适宜。

D. 建议每周进行一次离心，以去除积累的死细胞。

THP-1细胞冻存方法

A. 冻存时采用10% DMSO的冻存溶液：900μl FBS+100μl DMSO（DMSO有毒，请小心处理），也可使用无血清的冻存液。

B. 收集生长状态良好的细胞于15mL离心管中，将细胞浓度调整至约200万-300万/mL为宜。

C. 根据情况，将细胞置于-80℃培养箱中，最多保存3个月，建议尽快转移至液氮中进行长期保存。

常见问题

1. 如果在培养过程中THP-1细胞聚团怎么办？适量少量聚团属于正常现象，特别在低密度时。高密度时，细胞会自然分散，若仍聚团严重新可通过观察细胞状态、调整β-巯基乙醇添加量、或检视血清品牌及比例（不超过20%）来解决。

2. 如果THP-1细胞出现贴壁现象如何处理？少量细胞贴壁是正常现象，可轻轻吹打收集，或丢弃有贴壁的部分细胞。但如果贴壁细胞比例超过20%，则需检查培养箱的温度、CO2浓度、培养基成分，以及培养器皿是否存在异常。

3. THP-1细胞复苏不良怎么办？由于冻存后复苏率较低，建议在冻存时合理增加细胞数量，冻存时活细胞密度不应低于100万-300万/mL。复苏后需养护3-5天才能恢复状态，同时注意细胞温和处理，避免频繁离心。

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